基因疗法是一种强有力的治疗方式,它将遗传物质引入细胞,以取代有缺陷的基因,从而产生一种必需的蛋白质。如果一个有缺陷的基因导致所需的蛋白质出现缺陷或缺失,基因治疗可以通过引入一个“健康的”基因副本来恢复蛋白质的功能。

由于基因治疗产品的工作原理是将遗传物质引入细胞,科学家需要一种将DNA、RNA或核酸酶传递到目标组织和细胞的方法。携带遗传物质的传递系统被称为载体。

基于病毒或载体的基因疗法可能是治疗多种人类疾病的关键。当然,这些多功能、复杂的工具并非没有挑战。这些疗法发展和疗效的主要障碍是宿主免疫和炎症反应,这可能限制基因疗法成功到达靶细胞和传递基因有效载荷的能力。

基因治疗中使用的病毒和载体产生免疫原性的风险对患者来说是一种安全风险,因此根据美国食品药物管理局在美国,现有的免疫是必须通过寻找新的策略来降低基因治疗产品的免疫原性来解决的主要挑战之一。

免疫反应和炎症的影响可能对患者构成安全风险,也可能限制产品的疗效。因此,有必要对基因治疗产品的免疫原性进行彻底的表征,以便更好地了解其影响并更好地设计未来的基因治疗载体。

aav基因治疗中体液免疫原性测定的挑战

针对基于病毒载体的基因治疗,特别是腺相关病毒(AAV)的免疫应答的表征是当前业界的一个热门话题。现有抗AAV抗体的作用及其对疗效的影响尚不清楚,因此,需要更多的数据和经验来更好地指导开发这些疗法的赞助者的决策。

针对个体AAV血清型的抗药物抗体(ADA)分析和提供已有抗体个体频率数据的自然史研究是为非临床和临床研究提供背景的关键工具。根据年龄、地理位置和疾病状态,阳性个体的频率存在差异。用于检测这些抗体的高质量、灵敏的分析对于收集数据至关重要。

虽然目前还没有专门针对基因治疗的免疫原性的监管指导文件,但很多都可以利用2019年FDA的指导免疫原性。目前,ADA检测评估aav特异性抗体的预期是根据该指导文件制定的。用于其他生物治疗药物(如单克隆抗体)的敏感性靶标和性能标准也适用于aav特异性ADA检测。有一些特定的挑战必须克服,如识别阳性对照抗体和建立一个适当的切点,当有如此高的频率的阳性个人由于环境暴露。

通常情况下,ADA检测的切点是由至少50个人设置的。然而,在某些情况下,由于已有的抗体,你可能不得不将40-70%的人排除为异常值,需要筛查的人可能要比典型的50人多得多。也有公开的讨论,是否应该使用赞助商的装载有效载荷的特定衣壳,或者是否商用的“空”衣壳就足够了。目前有一份白皮书草案,代表了来自生物技术、制药、CROs和监管机构的个人团队,他们对这些检测方法提出了建议。

随着体液免疫原性,细胞免疫反应也很有趣。典型的方法包括使用像ELISpot测定细胞(如循环淋巴细胞)在受到来自病毒载体的肽刺激时产生的细胞因子。

虽然对这些检测方法的共识已经开始形成,但这些结果与安全性和有效性的关系仍有很多需要了解的地方。特别是,现有抗体作为纳入/排除标准的作用尚未明确界定。随着该领域从可靠的分析数据中获得经验,我们将继续学习和发展我们对这些现有抗体的影响和相关性的思考。

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