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吉姆博士Mcnally.
发布的吉姆博士Mcnally. Bioagilytix Insight,基因治疗

CRISPR-CAS9里程碑:第一个在活的有机体内临床试验目前正在波士顿进行

在基因治疗史上,第一次,CRISPR-CAS9基因组编辑技术将用于人类金宝博滚球体内临床试验在波士顿地区,被编辑医学和合作伙伴allergan领导。目前,第1/2阶段试验称为辉煌旨在包括18名患有遗传形式的盲肠盲,称为Leber的先天性生物疲劳10(LCA10),这是遗传儿童失明的最常见原因,并在每10万个诞生中大约两到三个发生。

虽然这个消息很令人兴奋,但在我们现代的医学日中表明另一个科学步幅,但它也会启动问题和担忧。虽然亮度试验将使用一种类型的基因编辑,但不会在后代复制(只有体细胞将是针对性 - 不是种系细胞),但整个治疗方法仍然是非常新的。只有几个月前,癌症患者患有CrispRp的组合治疗CAR-T疗法宾夕法尼亚大学

让我们仔细看看CRISPR-CAS9,了解其有希望的好处以及利用这种创新技术可以提起临床研究的潜在挑战。金宝博滚球

利用细菌防御对病毒的力量
CRISPRS.有规律地聚集在间隔短回文重复序列和CAS是crispr相关(CAS)酶。两者在某些细菌和古细菌的防御系统中都有重要的作用。CRISPR- cas9金宝博滚球技术改编自这种自然发生的基因组编辑形式,即在病毒攻击后加入CRISPR间隔序列,作为与病毒基因组部分相同的DNA片段,转录成短CRISPR rna (crRNAs),用于序列特异性检测和沉默。这改变了细菌对特定病毒的抵抗力,使其在病毒再次攻击时能够识别并锁定病毒的DNA。Cas9蛋白与cRNA和一个单独的反式激活cRNA (tracrRNA)结合,引导它到达目标位点,切割入侵的DNA,从而摧毁病毒。正如你从细菌免疫系统中看到的,生物体不仅需要抗体来非常有效地保护自己。

在实验室中,CRISPR-CAS9系统通过创建引导RNA与基因组中的特定DNA序列结合的同样的工作。Cas9酶与该RNA引导到待编辑的靶DNA序列,然后将Cas9精确地切割。此时,细胞可以通过非同源末端接合(NHEJ),添加或删除遗传物质,或通过同源驱动的修复(HDR)来修复DNA,或者通过同源驱动的修复(HDR)。插入新的DNA序列以校正导致疾病的突变。

基因编辑不同于更“经典”的基因治疗,后者是将整个基因的功能拷贝送到细胞中,以取代有缺陷的拷贝或替代缺失的拷贝。通过CRISPR-Cas9基因编辑,只有基因的突变区域被纠正。这就产生了基因编辑方法尤其可取的当基因治疗不可行时,因为替代基因太大——比如BRILLIANCE研究中的靶向基因CEP290——并且超过了常用的病毒基因传递系统的能力。

检测抗CAS9抗体在CRISPR治疗的患者中
理解CAS9蛋白来自细菌,我们可以更好地评估CRISPR-CAS9技术的潜在风险。金宝博滚球取决于分析已经发现,抗CAS9抗体存在于20%-80%的个体中。这不是因为Cas9最常见的同源基因源自金黄色葡萄球菌(SACAS9)和酿脓链球菌(SpCas9),这是人类遇到的两种常见病原体。健康个体对Cas9的抗体和t细胞介导免疫已经被描述过,虽然几篇发表的论文报告了不同的结果(见下表参考),但它们都指向结论,抗Cas9免疫需要作为评估的一部分基因治疗开发的过程。

出版物或文章 参考链接
等等。(2015)
腺病毒介导的小鼠肝脏在小鼠肝脏中PTEN的体细胞基因组编辑,尽管Cas9特异性免疫应答
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26086867.
咀嚼(2017)
对CRISPR Cas9和Cas12a疗法免疫
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1002/wsbm.1408
等等。(2018)
Crispr RNA在人体细胞中引发先天免疫应答
https://genome.cshlp.org/content/28/3/367.long
Charlesworth等等。(2019)
对人类Cas9蛋白预先存在的自适应免疫鉴定
https://www.nature.com/articles/s41591-018-0326-018-0326-018-0326-

值得注意的是,虽然抗cas9抗体的存在表明免疫系统之前已经接触过细胞内细菌蛋白,但这并不一定意味着cas9介导的基因编辑的效果会受到损害。然而,了解它们的流行情况和潜在的中和作用,作为对单个患者进行风险-效益分析的一部分,将是至关重要的,因为现有免疫的影响可能从没有临床效果到治疗效果下降,再到严重的不良反应。例如,在体内基因传递,Cas9在细胞内表达,而不直接暴露于循环中预先存在的抗Cas9抗体——但它们的存在可能表明患者可能有记忆T和B淋巴细胞能够对表达Cas9蛋白的细胞产生适应性免疫应答。一个最近的研究表明,抗CAS9 T细胞可以对Cas9反应在循环中,产生可以破坏感染宿主细胞的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。本文还指出体内基因编辑通常使用导致长期表达的病毒载体,更有可能在治疗后介导对Cas9的免疫应答。

影响在活的有机体内基因编辑
重要的是要注意周围的研究体内随着技术本身的近期和发展,使用CRISPR-CAS9仍然是新鲜的。金宝博滚球尽管如此,辉煌的研究是CRISPR基因编辑的一部分前进,特别是在许多人中使用的潜力很大体内应用程序。确保疗效和安全性基因疗法基于CRISPR-Cas9基因编辑工具,将需要仔细评估已存在的Cas9抗体的流行程度,并在整个临床开发过程和药物批准之后监测抗Cas9抗体——同时仔细考虑使用的载体、给药途径、以及其他对评估任何候选基因治疗的完整免疫原性的关键因素。

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作为118bet金博宝 克里斯尔 - Cas9等技术继续发展,Bioagilytix继续与支持他们发展所需的专家级生物分析服务保持步伐。联系我们的科学家如果你有一个特定的基因治疗项目,你想讨论一下。

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